1、 1 中文 2740 字 出处: Wang X J, Yuan S L, Xiao L, et al. The expression of c-src gene in the carcinogenesis process of human cardia adenocarcinomaJ. World Journal of Gastroenterology, 1999, 5(6):488-491. 人贲门癌癌变进程中 c-src 基因的表达 关键词: c-src 基因 ;表达产物 ; PP60c-src;肿瘤转移; 摘要: 目的: 探讨 c-src 基因在人贲门癌( CA)癌变进程中的活性,表达和
2、作用。方法:对56 例 CA, 34 例正常, 36 例癌旁上皮和 20 例 CA的转移淋巴结用特异的单克隆抗体 Mab327,免疫组化法检测 PP60c-src和 c-src 基因的表达。结果: PP60c-src的阳性率在正常上皮,增生上皮, CA 和转移淋巴结中分别为 29.4% (10/ 34), 94.4% (34/36), 71.4% (40/56)和 60.0% (12/20)。而且,各阳性率间有显著的统计学差异 (P 0.01。 CA 和增生上皮中的 PP60c-src的表 达水平显著高于正常上皮 (P 0.01 。 PP60c-src 的阳性率在乳头状,管状,低分化和粘膜腺癌
3、中分别为 75.0% (6/8), 81.8% (18/22) , 50.0% (10/20)和 100.0% (6/6),管状和粘膜腺癌中显著高于乳头状和低分化腺癌( p0.05)。结论: c-src 基因的活性和表达与人 CA的发生和发展相关; PP60c-src 蛋白数量在发癌过程中增加; PP60c-src 的表达与淋巴结转移相关。 介绍: 目前远端胃癌的发病率逐年下降,而贲门癌的发病率却在稳定增加。 CA 的生物学和流行 病学特征于远端胃癌明显不同,且原因不明 1-3 。 PP60c-src 是 c-src 基因的产物,具有酪氨酸激酶活性。 c-src 基因表达的增加在乳腺癌 4 ,
4、食管癌 5 ,胃癌 6 和结肠癌 7 中都有报道。 c-src 基因活性和表达可能与一些肿瘤的发生发展有关。我们先前的研究表明 c-src基因的活性和表达与食管鳞癌的分化和发展有关 8 。因此我们相信在贲门癌中也有相似的变化。 材料和方法 标本的收集和处理:所有的 56 例 CA 标本均来自肿瘤中心的手术后 CS 患者。所有的标本均经固定化程序,甲醛固定,石蜡包埋,至少两套 4m-6m 厚的石蜡切片。一个用 HE染色,一个做免疫组化。 试剂:单克隆抗体 Mab327 (小鼠 IgG)由日本大学分子病理系提供, 抗生蛋白链菌素免疫组化试剂盒 (Zymed USA)从 Fuzhou Maxim B
5、iotech 公司 购买。 PP60c-src蛋白的免疫组化分析: PP60c-src蛋白用 LSAB 方法 的免疫组化分析。组织切片在梯度乙醇中脱蜡脱水后,用 胰蛋白酶消化。用 3% H2O2阻滞内源性过氧化物酶的活性,用正常血清处理后,切片在稀释为 1 100 的 Mab 327 中孵育, 4过夜。在室温下,生物素化的 第二抗体 20 分钟, 抗生蛋白链菌素 30 分钟。再用含有 0.005% H2O2的 0.02%的 3,3-四盐酸 二氨基联苯胺染色。再用苏木精复染。 组织病理学检查: CA 和有关的损伤的组织病理学诊断,以及 CA 的组织学类型均由 2 名有经验的病理医生根据一定的标准
6、做出 8 。 PP60c-src免疫组化染色的定性和定量分析: PP60c-src的免疫染色按照已知的标准分析 5 。CA 中 PP60c-src阳性细胞的百分率按以下标准分级: 阴性 (-), 25% (+), 25%-50% (+), 50% (+)。 PP60c-src阳性细胞表性和细胞膜的染色强度与阴性对照: 阴性 (-),弱 (+),中度 (+) 和 强 (+)。 结果 组织病理学检查:在 56 例 CA 标本中,包括乳头状 (8/56),管状 (22/56),低分化 (20/56 ), 2 粘液腺癌 (6/56)和 20 例有淋巴结转移的 CA。 PP60c-src 的定位和分布: PP60c-src 蛋白阳性细胞在胞浆和胞膜上有褐染,在阴性对照中未发现有阳性染色。根据不同损伤和组织性的不同,染色的强度有变化。 PP60c-src阳性染色定位在腺细胞的顶部(图 1);在乳头状和管状腺癌,阳性染色分布 在乳头边缘和腺里层。胞浆和胞膜都为阳性染色