1、中文 3150 字 出处： Ying D, Xu Y, Ling D, et al. Down-regulation of miR-141 in gastric cancer and its involvement in cell growthJ. Journal of Gastroenterology, 2009, 44(6):556-561. miR-141 在胃癌和它相关细胞生长中的下调 摘要 目的：人类小 RNA-141（ miR-141）是 miR-200 家族的成员之一，已经被报道和多种人类恶性肿瘤相关。然 而，它与胃癌发生机理是否相关仍然未知。 因此，我们检测了 miR-141
2、在胃癌组织中的表达和 miR-141 的过表达对于癌细胞增殖的影响。 方法： miR-141 的表达水平在 35 组胃癌组织和癌旁组织以及 5 中胃癌细胞系中用实时定量 PCR 分别检测 。转染 miRNA 前体的 MGC-803 细胞的生长通过MTT 分析方法被检测到。 结果：与对照的癌旁组织相比 miR-141在 80%的初期胃癌组织中明显下调。在人类胃癌细胞系 MGC-803, HGC-27, SGC-7901 和 BGC-823中，同样发现 miR-141的表达大量减少。 miR-141和它前体的过表达能够明显的抑制胃癌细胞的增殖。 结论：这些结果都暗示了， miR-141可能通过抑制
3、细胞的增殖与胃癌的发展密切相关。 关键词 ： MiR-141，胃癌， MGC-803细胞，细胞增殖 引言 MicroRNAs(miRNAs)，是新近在动物和植物中发现的一类新的内源性，非编码的单链 RNA。 他们触发翻译的阻滞和 /或 mRNA的降解，大多数通过互补的结合靶mRNA的 3 非翻译区。研究表明 miRNAs能够广泛调节生物进程，如细胞增殖，分化，凋亡。越来越多的证据表明，通过调节 miRNAs的表达 可能在人类癌症的病理机制中起到多种多样的作用。 一些 miRNAs已经被证实有致癌或抑癌活性。高通量技术已经被用于检测在良性肿瘤和恶性肿瘤样本中 miRNAs的差异表达 ，同时 ，
4、在人类多种肿瘤中一些miRNAs失控也被发现， 包括肺癌，乳腺癌，肝癌，食道癌和前列腺癌 。在这些 miRNAs中， miR-141， miR-200家族中的一个成员，在卵巢癌和结肠直肠癌中被发现过表达，在前列腺癌，肝细胞和肾细胞癌变中表达下降，引起了关于 miR-141在癌进程中的作用的争论。 胃癌是世界上导致男性因癌症死亡的第二大原因，是导致女性 因癌症死亡的第三大原因。在美国 2008年，胃癌的新增病例统计数十 21500，死亡数十 10800。然而， miRNAs在胃癌中的作用知之甚少。在这里，我们检测了 miR-141在胃癌中的表达情况，并且发现在与作为对照组的非肿瘤组织的比较下，
5、miR-141在胃癌组织中有明显的下调。过表达 miR-141能够明显的抑制胃癌细胞的增殖，这一现象暗示了 miR-141在胃癌的病理机制中的 重要作用。 方法 临床样本和细胞系 组织取自于 来自孙中山医院，浙江大学附属医院，杭州人民医院的 35 名胃癌患者。在收集样本前已经获得同意权， 肿瘤样本是在手术过程中取到的。非肿瘤样本取自于肉眼所见的癌旁组织，同时被用于非肿瘤组织对照。所有的样本都被分为两份，一份被立即冻存，并保存在液氮中，用以进行 RNA 分析，另一份被储存在福尔马林中，用以进行病理分析。 病理学研究包括 HE 染色法由两位专业的病理学家进行独立的操作。其他的临床数据从孙中山医院的
6、医学记录中获得。表一总结了病人样本的临床和病理参数。 MGC-803, BGC-823, SGC-7901 和 NCI-N87细胞系用 RPMI1640培养基培养。HGC-27细胞系用 Dulbecco的改良 伊格尔培 养基培养。所有的培养基都补充 10%的胎牛血清。这些细胞系的特征总结在电子附表 S1中。 RNA提取和实时定量 PCR 组织和细胞系的总 RNA用 mirVana miRNA Isolation Kit提取。反转录得到成熟的 miRNAs，实时定量 PCR用特异性引物 has-miR-141扩增。实时定量 PCR使用Applied Biosystems 7500实时定量 PCR系统。相对定量 PCR都是用包括无模板的对照在内的三组平行管做的。所有数据都用了 U6表达作为标准。选用 ct的方程分析。正常胃组织被用作是细胞系的参照样 本。然后数据被转换成 log2值。 细胞转染和细胞增殖分析。 为了评估 NCI-N67,MGC-803,SGC-7901,HGC-27和 BGC-823细胞系
