1、 1 实习报告实习报告 学 院: 动物医学院 课 程: 兽医微生物实习 班 级: 学 号: 姓 名: 指导教师: 职称: 实习时间 实习地点 2010 年 6 月 13 日 2 实习报告实习报告 一一、目的要求目的要求 1 了解大肠杆菌和沙门氏菌（变形和产气）形态与染色特性以及主要培养 特性； 2 熟悉大肠杆菌和沙门氏菌（变形和产气）常规微生物学诊断法； 3 掌握大肠杆菌和沙门氏菌（变形和产气）生化试验的方法和原理； 4 熟悉大肠杆菌和沙门氏菌（变形和产气）在选择性和鉴别培养基上的生 长表现； 二二、实验材料实验材料 1.菌种：大肠杆菌和沙门氏菌混合液，产气肠杆菌和变形杆菌混合液 2.培养基：
2、半固体培养基 SS 平板 麦康凯平板 三糖铁高层斜面 蛋 白胨水 葡萄糖蛋白胨水 3.革兰式染色试剂：草酸铵结晶紫溶液、革兰氏碘溶液、95%酒精，沙黄水溶 液 4. 生化管：葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、枸橼酸盐、H2S、尿素 5. 生化试剂：吲哚试剂， MR 、VP 试剂 三三、实验内容及其实验内容及其安排安排 （一） 、 配培养基：S.S、麦康凯、半固体、三糖铁高层斜面、蛋白胨水、葡萄 糖蛋白胨水。 （二） 、 细菌分离培养：将大肠杆菌、沙门氏菌混合肉汤，产气、变形混合肉 汤分别接种麦康凯、SS 平板，染色镜检 （三） 、 挑取麦康凯和 SS 平板上单一菌落做染色、镜检，挑单一菌落接
3、种三 糖铁斜面(涂布、穿刺) （四） 、观察三糖铁中细菌生长情况。并挑取三糖铁斜面上的细菌分别接种蛋胨 水、葡胨水、半固体、微量生化管，37培养 48h。 （五） 、观察结果。 第一天、第一天、 配培养基配培养基（自由分组，5 人/组） 第一组 S.S 培养基：50g SS 培养基+800ml 蒸馏水，煮沸溶化浇平板（15ml/ 块平板） ，无需高压 第二组 麦康凯培养基： 44g 麦康凯培养基+800ml 蒸馏水+1.6g 琼脂粉，煮沸， 高压 15 磅，15 分钟，浇平板 第三组 三糖铁琼脂：30.5g 三糖铁琼脂+500ml 蒸馏水，煮沸溶化， 装长试管 50 根（10ml/管） ， 高
4、压 15 磅，15 分钟，做高层斜面 第四组 葡萄糖蛋白胨水：1.25g 蛋白胨+1.25g 葡萄糖+1.25g 磷酸氢二钾+250ml 水，加热溶解，调 pH 至 7.6，分装 40 根短试管高压（3 指半高， 3 约 5-8ml） 第五组 蛋白胨水：1.25g 蛋白胨+0.625gNaCl+125ml 水，调 pH 至 7.6，分装 40 根短试管，捆扎，高压，12115 分钟 （2 指高，约 2-4ml） 第六组 半固体：分别称取蛋白胨 5g、牛肉膏 2.5g、氯化钠 2.5g、磷酸氢二钾 0.5g、蒸馏水 500ml，加热溶解，调 pH7.6，过滤 称琼脂粉2g+肉汤500ml,煮沸，
5、 待琼脂粉完全溶化， 分装短试管 （2指高， 约2-4ml） 第二天、第二天、 分离培养分离培养 1.在麦康凯平板和 SS 平板上接种待检材料（大、沙混合菌液;产气、变形混合 菌液） 2.置 37恒温培养箱内培养 24 小时 3.观察每种平板上细菌的生长情况 4.比较单个菌落的形态：染色镜检 SS 琼脂 强选择性培养基 1.培养基中的煌绿、胆盐、硫代硫酸钠、柠檬酸钠抑制非肠道 菌生长 2.不能发酵乳糖的细菌，菌落橘黄色 3.分解乳糖的细菌产酸，使胆盐呈胆酸析出，形成中心混浊的深红色菌落 4.柠檬酸铁使产生硫化氢的菌落中心呈黑色 5.硫代硫酸具有缓和胆盐对细菌的有害作用及煌绿、中性红的毒性作用。
6、 麦康凯培养基 1.用于肠道菌的分离与鉴定 2.能分解乳糖的细菌-菌落红色 3.不能分解乳糖的细菌菌落灰白色 第三天第三天 观察结果观察结果 接种三糖铁接种三糖铁 1.观察麦康凯、S.S 平板上细菌生长情况可看到几种菌落，是否圆形光滑凸起 透明的菌落 实验结果：实验结果： （1 1）SSSS 琼脂琼脂 强选择性培养基：有橘黄色圆形凸起中心为黑色的菌落，橘黄色强选择性培养基：有橘黄色圆形凸起中心为黑色的菌落，橘黄色 为变形杆菌，黑色为产气杆菌。为变形杆菌，黑色为产气杆菌。 （2 2）麦康凯培养基：呈红色圆形凸起菌落和麦康凯培养基：呈红色圆形凸起菌落和呈呈灰白灰白色圆形凸起的菌落。色圆形凸起的菌落。其
