1、 11 分离和鉴定消臭细菌作用于有机硫化物恶臭 摘要 :应变 jii 筛选出不同气味的来源 ,可以有效降解甲基硫醇及 乙基硫醇 ,但 没有能力清除二甲 硫化物 .结果表明 ,该菌株 jii 单单能破坏 C SH 结合 .最适温度和 pH 值是 20-30 ,6.0-8.3 范围 .系统识别方法 16SrDNA 比较 ,脱臭细菌进 出 . 16srDNA 分析应变 jii 呈现最高 水平 97%. 关键词 :16SrDNA； 甲级 硫醇 ； 硫醇 介绍 挥发性有机硫化物排放的废水处理厂 . 木材制浆产业 . 炼油厂及下水道不单单损害 . 但是也是造成工人和附近 的 居民健康问题 (乔安娜 ,20
2、01). 有三种方法用于气味控制 . 生物 ,化学 ,物理方法 . 现在的重视生物法除臭处理 ,由于其高效率 ,而且被 环境可接受性 . 脱臭细菌起着关键作用的生物除臭技术 . 八十年代以来 ,许多 高效率除臭 硫化物的细菌已被 暴晒 和驯化 ,例如 硫杆菌 thioparus DW44(Kyeoungpsuk， 1 992)， 硫杆菌 thioparus strain HA43(Cho， 1991) 和硫杆菌 thioparus strain CH11(Chung， 2001； 1996) 分离泥炭除臭生物滤池 ，硫杆菌 thioparus TK-m (Gould,1992 ； Kanaga
3、wa ， 1989)and 硫杆菌 thiooxidans(Kyung-suk,2000)来自活性污泥 硫杆菌 thioparus Strain E6(Smith， 1988)from limicola 来自湖里 . 硫杆菌 thioparus Strain T5(Cho，1991； Chung， 2001)来自海里的淤泥等等 MM(甲硫醇 )， DMS(二甲基硫化物 )，污染的空气 中硫化氢 可以 被自养的细菌 有效地去除 .可是 .他们 大多数 通常难以成 为主因为它们的增长率均明显低于细菌 . 一些细菌分离分解有机硫化物恶臭 .例如 假单胞菌 acidovorance(Zhang， 19
4、91； Kanagawa， 1982)， Hyphoicrobium sp.Hyphoicrobium sp S(De Bont，1981)， Hyphoicrobium sp.EG(Suylen， 1987)， Hyphoicrobium sp 155(Pedemen 1995)and Xanthomonas sp (Kyeoungpsuk， 1992)etc.Hyphoicrobium sp (De Bont， 1981)能够使 二甲基硫化物转化为 甲醛和 甲硫醇 及产物 甲硫醇更进一步氧化成 甲醛和二价硫离子 Xanthomonas spp 具有特殊的代谢途径 ,可以 氧化甲硫醇 至 聚
5、硫化物 .这与天然的硫磺相似 . 铜绿 acidovorance只能把 DMDS(二甲 12 基二硫 )退化为 二甲基硫化物 但不能 进一步 分解成 二甲基硫化物 . 其短 培养时期 .所有 这些消臭细菌已被接种入 生物滤池 改善去除降解恶臭 . 作为最孤立消臭细菌有很狭窄范围选择性有机硫化物恶臭 ,失去筛查工作需要 为了获得高效率 ,质量好消臭硫酸 细菌 .这 细菌 有 待进一步鉴定和分类 . 16SrDNA基因试剂盒使细菌鉴定的基础上 ,它们的 16SrDNA 因子顺序 . 染色体的 DNA的提取细菌先通过 PCR的方法 ,然后分子利用分类 16SrDNA基因技术是更精确和更快速比生理和形
6、态学鉴定 . 1 材料和方法 1.1 消臭细菌来源 下列材料被剥削的启动培养基进行分离有机硫化物分解细菌 : 泥炭消臭 生物滤池 ,泥泞的松花江 ,黑粘土 ,活性污泥 和牛粪 . 1.2 浓缩 丰富的文化准备如下 :500 毫升瓶 ,每 200 毫升 LB 培养基与瓶塞 和此时 10 毫升 乙硫醇 的产物装进瓶子通过印章使用 注射器 . 1.3 实验仪器 实验设备在这方面的工作表现在 .1.每个 暂停 -生长 反应堆由一个 高 40cm 直径 5cm 的圆 杯 .在 底部的一个反应堆 喷射 石头附在驱散 硝酸盐空气进入 反应堆 .反应堆是厌倦和 0.5 升 营养液添加到通过 管口 放在每天包含
7、所有必要 大量营养和微量营养元素 来米 . ET(乙硫醇 )或 二甲基硫化物 在一个小瓶子 再放进 广口瓶和 引入空气 .进 乙硫醇 或 二甲基硫化物 浓缩再由 由空气稀释 甲硫醇 (99%),撤销了蠕动泵 ,并混合空气 ,创造适当的混合气浓度 . 1.4 分析方法 乙硫醇 的 浓度 和 甲硫醇 测量用气相色谱仪 (层析 n2000,浙江大学 )配备了不锈钢栏 和 火焰电离 检波器 . 瓷砖 操作条件所定 :注射器 200 度 , 圆柱 80 度 . 瓷砖 pH 值是用 PHS-3C 类型 PH 计硫酸盐含量的测定硫酸钡光度计 . 2 结果与讨论 2.1 选择和生物性状的菌株 JII 结果表明
8、 ,筛选到 32 株细菌可以生活在高浓度 乙硫醇 富集培养 , 其中有 8株可降解 乙硫醇 .稳定 及高效率的除臭细菌是靠多次反复 传输 .甲硫醇 天然气 (50 13 毫克 /立方米 )的供应 每度 0.4立方米 /小时 的曝气管中炬接种 (图 1). 气泡到达 表面 4 秒 .初期低去除往往归因于适应期的细菌以 习惯于 新 条件 .但 , 5 小时后甲硫醇 的反应 去除 效率 超过 70%. 后均衡 就是到了 甲硫醇 的去除率维持稳定而持续 在 80%一 84%. 比较 10%去除 甲硫醇 的营养液无注射 ,如被证明是非常有益的恶臭 甲硫醇 去 除 . 和 甲硫醇 相同 ,JII 能降低
9、乙硫醇 的效率 .经过 7 小时的运转 , 乙硫醇 的去除率达到最大的 72%与业务条件之一 : 进气 ,流速 0.5 米 /小时 ,一个四口气体浓度 35毫克 /立方米 . 但菌株无 能力 消除二甲基硫化物 ,如表 fig.2.因此 ,这项研究表明 ,应变 jll似乎 破坏 C-SH.更多 负离子含有硫在反应器污水啤酒等 ；过程中 生物递级降解 甲硫醇 和 乙硫醇 . 该反应堆 PH 价值 6.8-7.4 在运作之前 , 运作时 PH 值介于 6.4 至 7.1. 2.2 JII 的形态和生理特性 扫描电子 显微照片 和 显微照片 的细菌列 fig.3和 fig.4. 他们 形态特征如下 :
10、 菌落形态于营养琼脂平板误差小于 1 毫米 ,柠檬黄 ,半透光 ,圆圆的 ,经常整 ,亮晶晶的一个四高凸 ； 旧殖民地轮流布朗 ； 细胞形态 ,杆形 0.5 通过 0.8-1.0 微米 ； 稳定 ,无鞭毛杆 ； 革兰氏阴性菌 ； 非孢子形成 ； 有氧 .温度和 PH 值对生长影响 .最适 JII 生长发生在 20-37 ,pH 值 6.0-8.3. 3 结论 在这项研究中 ,我们成功地运用 LB培养含有 乙硫 醇 高效脱臭菌 :应变 JII.这能有效降解 甲硫醇 和 乙硫醇 . 他们 去除率仍可以达到 84%和 72%,在 各地 .运转 激活 淤泥 .但 应变生病没有能力消除 二甲基硫化物 .结果证明 JII 似乎只有 破坏C-SH 结构 . 乙硫醇 而 化学计算的 氧化成 硫酸根 ,生物递降分解 过程 .JII 的最适合 PH 值在 6.0-8.3. 该 隔离群种 被怀疑是 黄质菌属 .基于 形态和生 物化学的特征 .但是 ,生化菌种鉴定 比较 困难和 强烈 . 所以 , 应变 菌属 JII 16SrDNA 基因序列 ,表明这是一个新的密切 关 际 的 物种 .
